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液相色谱仪色谱柱使用及维护

2017-08-18

 液相色谱仪使用卡套柱时,两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗,任何时候都不能将卡套取下来,否则会造成填料的流失。

 
  卡套柱的安装(加预柱)
 
  1.将卡套架套入柱芯
 
  2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使夹套高于柱芯(见下图)
 
  3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高过夹套片
 
  4.将"预柱放入卡套片内
 
  5.将卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手拧紧
 
  6.然后依同样的顺序连接好柱子的另一端
 
  平衡色谱柱
 
  反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱;如果您所使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"。
 
  硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡
 
  如何平衡色谱柱?
 
  平衡过程中,将流速缓慢地提高
 
  用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的时间来平衡)
 
  色谱柱的再生   进行色谱柱再生时,应使用一个谦价的泵,我们建议zui好不使用您的液相色谱仪上的泵。
 
  表1 建议用来冲洗的溶剂体积
 
  注意:
 
  在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。
 
  **如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。
 
  色谱柱的维护
 
  1.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)
 
  2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围
 
  3.避免流动相组成及极性的剧烈变化
 
  4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理
 
  5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存大乙腈中
 
  6.压力升高是需要更换预柱的信号

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